Capítulo 32 Ácido




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títuloCapítulo 32 Ácido
fecha de publicación02.08.2016
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Capítulo 32
ÁCIDO

DESOXIRRIBONUCLEICO









DNA FINGER PRINT

El ácido desoxirribonucleico (DNA), tanto nuclear como mitocondrial, se utiliza como herramienta serológica reveladora de la serología convencional sometible a la sangre, semen, saliva y otros fluidos corporales, para detectar la presencia de factores relativos al grupo sanguíneo ABO, Rh e indicadores de proteínas, constituyéndose como una prueba de identificación insuperable tanto en vivos como restos cadavéricos, en delitos sexuales y comprobación tanto de paternidad como de maternidad

ESTRUCTURA


El DNA se presenta como un modelo de cadena molecular de doble enlace en forma de hélice que avanza a través del núcleo de todas las células nucleadas del organismo, con una secuencia diferente entre los diferentes organismos con enlaces de adenina (A), citosina (C), guanina (G), y timina (T), encadenadas cuasi-infinita que se unen siempre en la misma forma, de tal manera que la adenina se enlaza con la citosina (A-C) y la guanina con la timina (G-T) mediante puentes de azúcar-PO4-azúcar que dan el contenido genético corporal, pero existen algunos segmentos polimórficos (DNA-chatarra) variables que son los que dan las características fundamentales que individualizan a cada sujeto y que constituyen una huella genética identificadora

PROCESAMIENTO


Se introduce el material en un buffer determinado para lisar a las células y obtener sus núcleos y se realiza una extracción de fenol para eliminar proteínas, lípidos y RNA contaminantes para continuar con cloroformo para eliminar el fenol, obteniendo el DNA en forma dispersa y transparente que precipita con etanol y acetato sódico conformando una madeja de DNA visible que se deseca a temperatura ambiente que se deshidratará en buffer y poder medir su concentración mediante espectrometría o de espectro-fluorimetría

Se realiza paralelamente un desarrollo electroforético para probar que el DNA obtenido es de largas cadenas, comprobando que no fue cortado por enzimas restrictoras contaminantes desconocidas que invalida cualquier estudio posterior

Se extrae un segmento relativamente grande de DNA puro de cada espécimen biológico, el cual, se mezcla con una enzima (enzima Hinfl) de restricción (retristasa tipo II) que corta su cadena en sitios específicos para obtener el segmento polimórfico

Los fragmentos se procesan mediante la electroforesis en gel, que hace su recorrido hacia la carga positiva, desplazándose con mayor rapidez los segmentos más cortos dando paso a un alineamiento por tamaño.

Después del recorrido se transfiere la formación a una membrana de nylon llamada secante, en donde se aplica una sonda genética (radioactiva) que localiza los segmentos polimórficos y se adhiere a ellos y se hace una autorradiografía mediante rayos X, manifestándose como manchas oscuras, conocida como impresión de DNA

ALELO ESPECÍFICO


Las impresiones de DNA permiten establecer las coincidencias de los segmentos polimórficos llamados alelos en la conformación probabilística de identificación de uno entre 1´189,200,000 individuos

PRUEBA DE CETUS


En esta prueba se purifica el DNA y se clarifica mediante la reacción en cadena de polimerasa (RCP), al calentar y enfriar el ácido, para obtener unas cuantas muestras de alelos determinado y producir hasta 10 millones de copias porque las sondas se adhieren a los puntos en que se encuentra ese alelo en particular

DNA MITOCONDRIAL

En un cabello existe suficiente DNA proveniente de las mitocondrias para ser analizado, pero no tipifica lo suficiente como para identificar a una persona, pero si de aquel obtenido de las células foliculares adheridas al cabello

SONDEO

Cada gen humano presenta varias regiones llamadas minisatélites que encierran y repiten secuencias básicas. La diferencia del número en estas regiones permite diferenciar a cada individuo mediante 30 a 40 bandas oscuras en la imagen de Rayos X como patrones de fácil lectura y que se presentan en el mercado con las marcas Lifecodes y Cellmark, que son usadas en los trabajos médico legales

LIFECODES


Identifica la secuencia de repetición en lotes de número variable (RLNV) que aparecen en el DNA en cuatro sitios específicos en cada muestra. Cada sondeo RLNV tiene una probabilidad de encontrar de un centenar a dos personas en el mismo patrón, pero que multiplicado por los cuatro patrones de los cuatro diferentes sondeos se remonta a una posibilidad de 1 en 189,200,000 (ciento ochenta y nueve, doscientos mil) en el público en general

CELLMARK


Marca uno o varios lugares como una sola impresión y cuya probabilidad de repetición son de 1 en 10,000,000,000 (diez mil millones)

BASES MEDICOLEGALES PARA SU USO EN CRIMINALÍSTICA

El DNA porta la información genética transmitida de padres a hijos conforme a los postulados mendelianos, por lo que una mitad corresponde a la madre y la otra al padre

La estabilidad del DNA permite aislarlo e identificarlo aún después de años (aún de cuerpos momificados de milenios)

Se encuentra en el núcleo de las células, por lo que es de utilidad medicolegal, al obtener pequeñas muestras de material celular tanto de la víctima como del victimario, e incluso de plantas y animales presentes e involucrados en el acto o en la omisión criminal

La forma secuencial y determinada, permite identificar al individuo del cual se tiene la muestra






Jus Médica: Medicina Legal y Forense Dr. Jorge Castellanos Sainz

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