Esquema de profilaxis general; (enfermedades transmisibles)




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fecha de publicación09.02.2016
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Pasiva: inducida por la administración de anticuerpo, células preformados en otro cuerpo (sueros de anticuerpos). Ej. De la madre al feto, niño en la lactancia, administración de antitoxinas tetánicas, diftérica, etc.).

Activa: se obtiene mediante el contacto efectivo con microorganismos o sus productos y pueden ser:

  • Infección clínica o subclinica

  • Inmunización con agentes infecciosos vivos atenuados o muertos (vacuna de la polio)

  • Inmunización con toxoides. Ej. Toxoide tetánico.

DIFERENCIAS ENTRE TIPOS DE INMUNIDAD

Inmunidad Activa

Inmunidad Pasiva

Requiere contacto previo con el agente

No requiere contacto previo con el agente

Se produce anticuerpo y celula especifica

No se produce anticuerpo y células especificas

Comienzo tardio

Comienzo inmediato

Dura mucho tiempo

Dura poco tiempo


Una vez que se produce la invasión del agente es fagocitado por monocitos o macrófagos que dentro, los fragmentos antigénicos se asocian al CMH2 y son expuestos en la membrana y presentado a los linfocitos T helper (CO4) que liberan IL reguladoras que activan y estimulan las líneas de linfocitos B implicadas, parte se transforman en linfocitos B de memoria y gran parte en plasmocitos productores de anticuerpos, también los antígenos pueden ser reconocidos en forma directa por los linfocitos B que al internalizarlos y asociarlos al CMH2 pueden presentarlos a los linfocitos TH que liberan los IL con su consiguiente acción.

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Esencialmente en la inmunidad celular, una vez que ingresa el virus, los antígenos fragmentados se asocian al CMH1, luego alcanzan la membrana celular para ser presentados a los linfocitos T citotoxicos (CD8) que secretan IL-1 que producen una estimulación funcional y proliferativa de linfocitos específicos, si estos TC se encuentran posteriormente con otras células infectadas con el mismo virus y su reconocimiento se produce la lisis de la célula por un fenómeno llamado apoptosis o muerte celular programada.

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Las respuestas que se obtienen a una primera exposición a un antígeno difiere de la que se desarrolla en la segunda exposición al mismo agente.

Respuesta inmune primaria

  1. Presenta un periodo de latencia prolongado (días) en el que los anticuerpos no son detectados en el suero.

  2. El titulo de anticuerpo que se produce no es muy elevado y su duración se corta.

  3. La IgM es la primera inmunoglobulina que aparece y a un titulo más elevada que la IgG.

  4. La concentración de IgM declina más rápidamente que la concentración de la IgG.

  5. Se forman células de memoria que se diferencian parcialmente y que explican las características de la respuesta secundaria.

La respuesta inmune secundaria


  1. Presenta un periodo de latencia más corto.

  2. El titulo de anticuerpo que se alcanza es mucho mayor y permanece en el suero durante un periodo más largo.

  3. Aparece la IgG a un titulo más elevado que la IgM.

  4. La concentración de la IgG declina hasta un límite que puede durar toda la vida.

  5. Las células de memoria formadas y diferenciadas parcialmente en la respuesta primaria alcanzan más rápido el estadio de células productoras de anticuerpos y por ello hacen que el tiempo de latencia sea más corto.


Hipersensibilidad

Es un fenómeno mediante el cual el sistema inmune de un individuo responde de una forma alterada o exagerada ante una sustancia extraña, lo que trae como consecuencia lesiones de los tejidos.

Esta forma de respuesta tiene la característica de poseer memoria y especificidad inmunológica. También se lo conoce como alergia.

Según el tiempo de aparición de las manifestaciones pueden ser inmediatos (aparecen antes de las 24 horas del contacto con el agente y se relacionan con la aparición de los anticuerpos) o retardadas (después de los 24 hs del contacto y están relacionadas con la presencia de linfocitos T).

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Propiedades generales de los virus

Los virus son considerados como las partículas vivas mas pequeñas, formadas por un acido nucleico y proteínas, los cuales podemos encontrarlos en estado libre (partículas inertes) o intracelular.

Concepto: son agentes infecciosos muy pequeños que varían de 20 a 300 nm de diámetro, contiene como genoma un solo acido nucleico (ADN o ARN) el cual esta re cubierto por un capside formado por capsomeros y algunos presentan además una envoltura lipoproteica.

La unidad infecciosa integra se denomina virion.

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Una vez que el virus hace contacto con un huésped susceptible, ingresa a la célula adquiere vitalidad y comienza a replicarse.

El genoma del virus tiene información que puede hacer que la célula infectada sea programada a sintetizar las macromoléculas especificas del virus necesarias para producir la progenie viral.

Durante el ciclo replicativo se produce un gran número de copias del acido nucleico viral y de las proteínas especificas con diferentes funciones. La infección por el virus puede tener efecto escaso o nulo sobre la celula del huésped o provocar daño o muerte celular.
Morfología

  • Capside: Envoltura proteica que encierra al genoma del acido nucleico.

  • Capsomeros: Unidades estructurales virales icosaedricas, constituidas por grupos de polipeptidos.

  • Nucleocapside: Complejo proteína-acido nucleico que representan la forma de presentarse el genoma viral.

  • Envoltura: membrana lipidica que rodea algunas partículas virales, es parte de un proceso de gemación a través de una membrana celular.

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  • Virus defectuoso: Es una particula viral deficiente.

  • Seudoviriones: Particulas de capsides que envolvieron acido nucleico del huésped en lugar del viral, por lo que no se pueden replicar pero se asemejan a los viriones.

  • Unidades estructurales: son proteínas de los elementos constitutivos básicos de la cubierta. Habitualmente forman un conjunto de mas de una subunidad proteínica no idéntica. Las unidades estructurales también se conocen como protometros.

  • Estructura primaria, secundaria y terciaria del acido nucleico: La estructura primaria se refiere a la secuencia de bases en la cadena del acido nucleico. La estructura secundaria se refiere al arreglo espacial de la cadena completa del acido nucleico, ya sea que tenga conformación circular o linear, de tira aislada o doble tira. La estructura terciaria se refiere a otros elementos de fino detalle espacial en la hélice.

  • Transcripción: Mecanismo por medio del cual la información específica cifrada en una cadena de acido nucleico se transmite al ARN mensajero.

  • Traducción: Mecanismo por medio del cual una sucesión seriada de bases particulares en un acido nucleico mensajero de por resultado la producción de una sucesión especifica de aminoácidos en una proteína.


Clasificación de los virus

Se confeccionaron distintas clasificaciones que se agrupaban según: El hospedero parasitado (virus de plantas, de insectos, aves, bacterias, animales), el tropismo a órganos o tejidos (virus dermotrópicos, piel y mucosas, etc.).

En la actualidad es común clasificar a los virus según el genoma (ADN o ARN).

Como todas estas clasificaciones son muy generales, mucha información no uniforme:

  1. Morfología del virion que incluye tamaño, forma, tipo de acido nucleico, presencia o ausencia de peplómeros, y presencia o ausencia de membranas.

  2. Propiedades fisicoquímicas del virion como masa molecular, densidad de flotación, estabilidad de PH y a la temperatura y susceptibilidad a los agentes químicos y físicos, sobre todo al éter y a los detergentes.

  3. Propiedades del genoma del virus, que incluyen tipo de acido nucleico (ADN o ARN), tamaño del genoma en kilobase (kb) o kilopares de bases (kpb), tipo de cadena (sencilla o doble), lineal o circular, sentido (positivo, negativo, ambos sentidos), segmentos (numero, tamaño), secuencia de nucleótidos.

  4. Propiedades de las proteínas del virus, como numero, tamaño y actividad funcionales de las proteínas estructurales y no estructurales, secuencias de aminoácidos, modificaciones y actividades funcionales (transcriptasa, transcriptasa inversa, neuroaminidasa, actividad de fusión.

  5. Organización y replicación del genoma, que incluye orden de los genes, numero y posición de los marcos de lecturas abiertos, estrategia de replicación (patrones de transcripción, traducción), sitios celulares (acumulación de proteínas, ensamblaje del virion, liberación del embrión).

  6. Propiedades antigénicas (si es virulenta).

  7. Propiedades biológicas, que incluye variedad de huéspedes naturales, modo de transmisión, interrelacion con el vector, patogenicidad, tropismo tisular y patología.


Sistema universal de toxonomia de los virus

Se clasifican en familias con base en la morfología del virion, estructura del genoma y estrategias de multiplicación. Los nombres de las familias de virus llevan el sufijo –viridae.

En cada familia las subdivisiones (denominadas generos) habitualmente se basan en diferencias fisicoquímicas o serológicas. Los criterios utilizados para definir el género varían de una familia a otra. Los nombres de los generos llevan el sufijo –virus.
Estructura y tamaño de los virus

Los virus carecen de estructura celular, no tiene nucleo, ni membrana celular.

Se multiplican solo en células vivas, fuera de este son totalmente inertes. Cada particula vírica esta formada de solo dos partes principales: el acido nucleico (ADN o ARN) y una cubierta protectora de proteína denominada capside.

Los virus pueden presentar o no una membrana exterior llamada envoltura o peplomeros.

La forma de lo virus esta determinada por la capside, por tanto el estudio de la forma no es mas que el estudio de la capside proteica. Conocer la estructura del virus incrementa el conocimiento del mecanismo de ciertos procesos, como la interaccion de partículas virales con receptores de la superficie celular y anticuerpos neutralizantes. También puede conducir al diseño razonado de fármacos antivirales capaces de impedir la adhesión del virus, la perdida de su cubierta o el ensamblado de este en células susceptibles.

La estructura genética viral requiere de la suma de muchas moléculas idénticas de una o varias proteínas (subunidades).

Se pueden agrupar en tres tipos de acuerdo a como se conforman las subunidades:

Con simetría cubica: Que tienen patrón icosaedrico, con 20 caras (triangulo equiláteros) y 60 subunidades químicamente idénticas que encierran al genoma viral. Ej adenovirus, hepatnavirus.

Simetría helicoidal: Aquí las subunidades de proteínas se unen al acido nucleico viral formando una hélice. Este complejo (ac. Nucleico-proteína) a su vez se enrolla dentro de una envoltura de lípidos. Esta interacción constante hace que no sean posibles las partículas helicoidales vacías.

Estructuras complejas: son partículas grandes que presentan estructuras más complicadas, con gránulos en su interior y no muestran simetría cubica ni helicoidales. Ej. Poxvirus.
Composición química de los virus
Proteínas
Principal constituyente de todos los virus (proteínas estructurales).

Funciones: facilitar la transferencia del acido nucleico viral de una célula huésped a otra.

  • Proteger al genoma viral contra la inactivación por nucleasas.

  • Participan en la adhesión del virus a una célula susceptible.

  • Contienen simetría a la partícula viral.

  • Determina las características antigénicas del virus.

  • Actividades específicas.

  • Enzimáticas.

Acido nucleico


  • Contiene toda la información genética.

  • Contiene un solo tipo de acido nucleico (ADN, ARN).

  • Se puede caracterizar G + C.


Envoltura lipida (no todos contienen)


  • Es una estructura que contiene lípidos neutros, fosfolípidos y glucolípidos, semejantes a la composición de la membrana celular en el cual se multiplica.

  • La nucleocapside viral adquiere la envoltura cuando sufre la gemación a través de la membrana en el momento de la maduración.

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Los virus que contienen lípidos son sensibles al éter y a otros solventes orgánicos, por lo que la pérdida de envoltura causa perdida de la infecciosidad.

Los virus sin lípidos son resistentes al éter.
Glucoproteínas virales


  • Son partes de las envolturas virales, pero a diferencias de los lípidos que son derivados de la membrana celular, estas son codificadas por el genoma viral.

  • Su función es adherir al virus a una célula específica por interacción de un receptor y la fusión con la membrana durante la infección.

  • Son importantes antígenos virales.

  • Como consecuencia de su posición en la superficie exterior del virion, casi siempre participan en la interacción de la partícula viral con el anticuerpo neutralizante.


Algunos virus importantes
Virus que contienen ADN

  • Adenovirus: simetría cubica, carente de envoltura, infectan las mucosas respiratorias, conjuntivas y gastrointestinales.

  • Herpesvirus: simetría cubica, con envoltura (tipo I, tipo II, Epstein-barr, varicela zoster, citomegalovirus).

  • Hepadnavirus: simetría cubica, con envoltura, causantes de las hepatitis crónicas y agudas.

  • Poxvirus: virus muy grandes, de simetría compleja con envoltura, producen lesiones cutáneas. Ej. Viruela.


Virus que contienen ARN

  • Picornavirus: virus pequeños, de simetría cubica y sin envoltura, encontramos los enterovirus (polio, coxsackie, echovirus), los rinovirus y los hepatovirus (hepatitis A).

  • Togavirus: simetría cubica, con envoltura, virus de la rubeola.

  • Coronavirus: simetría cubica, con envoltura, y prolongaciones en forma de pétalos. (virus del resfriado común).

  • Retrovirus: virus esféricos, de simetría helicoidal, con envoltura, HIV, virus del sarcoma.

  • Ortomixovirus: simetría helicoidal, con envoltura y prolongaciones con actividad hemaglutinina y neurominidasa, son virus de la influenza causantes de pandemias.

  • Paramixovirus: similar al anterior, mas grandes incluyen al virus del sarampión, parotiditis, parainfluenza y sincitial R.

  • Rabdovirus: partículas en forma de bala con envolturas, con espinas (virus de la rabia).


Cultivo y análisis de los virus
El aislamiento y la identificación de los virus se ha facilitado por la disponibilidad de células que crecen in vitro bajo condiciones estrictamente controladas.

Existen tres tipos de cultivos:

  • Primarios: cultivos celulares directamente de tejidos de órganos, de los cuales se obtienen suspensiones celulares.

  • Secundarios: cuando han experimientado pases de cultivos in vitro en células diploides, en las que las células se van modificando pero retienen su patrón cromosomal normal.

  • Huevos embrionados y animales de experimentación (para la producción de vacunas).

El tipo de cultivo celular utilizado depende de la susceptibilidad de la célula a dicho virus en particular.

En el laboratorio la multiplicación de un virus se puede detectar de varias maneras:

  1. Cultivo celular

  2. Formación de cuerpos de inclusión

  3. Daños a los cromosomas.


Cuantificación de los virus


  1. Métodos físicos:

Pueden contados por campos en microscopios electrónico inmunofluerencia, mediante su comparación con una suspensión estándar de partículas de latex de tamaño semejante. Sin embargo, una preparación relativamente concentrada de virus es necesaria para este procedimiento, y las partículas virales infectantes no pueden ser distinguidas de las no infectantes.

Hemaglutinación: los eritrocitos pueden ser aglutinados por muchos virus diferentes. La hemaglutinación por virus ha conducido a métodos de conteo rápido y barato para el análisis viral. Ya que los virus no infectantes dan la reacción, la prueba mide el total de partículas virales presente.

Algunas pruebas serológicas, como el radioinmunoensayo (RIA) y el análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas (ELISA); pueden estandarizarse para cuantificar la cantidad de virus en una muestra. Estas pruebas no distinguen partículas infectantes de no infectantes y a veces detectan proteínas virales no ensambladas en las partículas.

  1. Métodos biológicos:

  1. Titulación: es la medición de la cantidad de virus en termino del número de unidades infecciosa.

  2. Análisis en placa: se inoculan virus en diluciones adecuadas sobre monocapas de células huésped y después de la adsorción, son recubiertas con medio que contiene agar o carboximetilcelulosa para prevenir la diseminación viral a través del cultivo.

  3. Después de varios días, las células inicialmente infectadas han producido virus que se diseminan solo a las células circunvecinas, produciendo una pequeña zona de infección o placa. En condiciones controladas, una sola partícula viral, denominada “unidad formadora de placa” (UFP) origina infección en una sola placa.



Purificación e identificación de los virus
Para obtener una partícula pura se deben seguir varios pasos.

  • Usar grandes cantidades de material de cultivo donde el virus se replico, líquidos corporales o células infectadas.

  • Se debe concentrar las partículas virales mediante la precipitación con sulfato de amonio, etanol, o ultra centrifugación.

  • Una vez concentrado se debe separar de los materiales del huésped mediante centrifugación diferencial, centrifugación por gradiente de densidad, cromatografía en columna y electroforeis.

  • Generalmente, se requieren más de un paso para lograr una purificación adecuada y la combinación de más de un método.

  • El criterio mínimo de pureza es un aspecto homogéneo en las microfotografías electrónicas y el fracaso de procedimientos adicionales de purificación para retirar contaminantes sin reducir la inefectividad.

Una partícula viral puede considerarse como tal cuando cumple los siguientes criterios:


  1. La partícula solo se puede aislar de células o tejidos infectados.

  2. Las partículas obtenidas de varias fuentes son idénticas, cualquiera que sea la especie celular en la cual creció el virus.

  3. El grado de actividad infectante de la preparación varía directamente con el numero de partículas presentes.

  4. El grado de destrucción de la partícula por medios químicos o físicos se acompaña de una pérdida correspondiente de la actividad viral.

  5. Debe demostrarse que la infecciosidad y ciertas propiedades de las partículas son idénticas, como su comportamiento de sedimentación en la ultracentrífuga y las curvas de la estabilidad con respecto al PH.

  6. El espectro de absorción en el rango ultravioleta de la particula física purificada debe coincidir con la inactivación del virus en el espectro ultravioleta.

  7. Los antisueros preparados contra el virus infectado deben reaccionar con la partícula característica y viceversa. La observación directa de un virus desconocido se puede lograr mediante examen con microscopio electrónico del agregado que se forma en una mezcla de antisuero y suspensión viral cruda.

  8. Las partículas deben ser capaces de inducir in vivo la enfermedad característica (si estos experimentos son factibles).

  9. Los pases sucesivos de las partículas en cultivo de tejidos deben producir una progenie con las propiedades biológicas y serológicas del virus.


Seguridad en el laboratorio
Todas las muestras que llegan al laboratorio para su procesamiento e intentos de realizar diagnostico son potencialmente infecciosas y si no se siguen una metodología apropiada, pueden exponer al personal del laboratorio al riesgo de una infección, por lo que hay que tener en cuenta los siguientes riesgos:

  1. Aerosoles generados durante una homogeneización de tejidos, centrifugación, vibraciones ultrasónicas o por rotura de envases de vidrio.

  2. Ingestión por pipetear con la boca, por comer o fumar en el laboratorio, o por lavado inapropiado de las manos.

  3. Penetración a través de la piel por pinchazo con agujas, rotura de envase de vidrio, contaminación de las manos por escurrimiento de envases, manejo de tejidos infectados, mordeduras de animales.

  4. Salpicaduras en los ojos.


Las normas de bioseguridad en el trabajo:


  1. Adiestramiento en técnicas asépticas y empleo de las mismas.

  2. Prohibir pipetear con la boca.

  3. No comer, beber o fumar en el laboratorio.

  4. Empleo de batas y guantes protectores (que no deben emplearse fuera del laboratorio).

  5. Esterilización de los desechos experimentales.

  6. Empleo de gabinetes de bioseguridad.

  7. Inmunización cuando se dispone de vacunas.


CICLO VIRAL
Se refiere a todo lo que pasa en la célula hasta que sale

REPLICACION VIRAL

Los virus solo se replican en células vivas, necesitan energía, precursores y maquinarias de síntesis para las proteínas virales.

Durante el proceso de replicación deben cumplirse los siguientes pasos.

  1. Adsorción

  2. Penetración

  3. Eclipse o periodo de latencia

  4. Biosíntesis de macromoléculas

  5. Ensamblaje y liberación

  1. ADSORCION:

En su cubierta, el virus tiene proteínas externas que son atraídos con fuerza hacia el receptor especifico que se encuentra en la superficie de una célula diana, al unirse al receptor se activan otra proteínas en la membrana de la célula que permiten la penetración.

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  1. PENETRACION:

Una vez establecida la adsorción, los virus pueden entrar en la célula a través de dos mecanismos.

  • FUSION:

En la que la superficie celular y la superficie viral se fusionan y el virus libera su material genético dentro de la célula (generalmente en los virus envuelto. Ej el HIV).

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  • Endocitosis mediado por receptores: El virus utiliza la misma vía de entrada que emplean muchas macromoléculas fisiológicamente importantes, donde el virus absorbido a su receptor va quedando encerrado dentro de una invaginaciones de la membrana plasmática formando una vesícula que luego al atravesar la membrana celular es expulsado el genoma vira al citoplasma celular (esta vía es utilizada generalmente para virus desnudos).

http://caibco.ucv.ve/caibco/vitae/vitaecinco/articulos/virologia/figura2.jpg


  1. PERIODO DE LATENCIA O ECLIPSE:

Es el momento en que el virus después de penetrar a la célula se pierde todo tipo de rastro, desaparece toda huella del mismo. En esta etapa se produce la descapsidación del acido nucleico que se incorpora al genoma celular y se apodera de la maquinaria celular dirigiendo a partir de ese momento la síntesis del nuevo virus.

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  1. BIOSÍNTESIS DE MACROMOLECULAS:

Se basa en la expresión de la información contenida en el genoma que permitirá la biosíntesis de proteínas y ácidos nucleicos constituyentes de la nueva progenie. Comprende tres tipos de eventos:


  • TRANSCRIPCION

Para llevar a cabo la transcripción es necesario la integración del acido nucleico viral al núcleo celular, pero solo se integra como ADN, por lo tanto, los virus ARN necesitaran una TRANSCRIPTASA INVERSA para la conversión de ARN a ADN y poder integrarse al genoma celular para luego producir ARNm virales y transcribir sus mensajes.

  • TRADUCCION

Los virus utilizan el sistema provisto por la célula huésped, tanto ribosomas como factores de iniciación y demás elemento para traducir los mensajes de los ARNm en proteínas estructurales (las que constituyen el vibrión) y no estructurales (cumplen distintas funciones pero no forman parte del vibrión, por ej. POLIMERASAS, PROTEASAS, PROTEINAS PARA ENSAMBLAJE, etc.)

  • REPLICACION DEL GENOMA VIRAL:

Se realiza la duplicación del acido nucleico para obtener copias del mismo, que juntos con las proteínas estructurales formaran la progenie del vibriones.

5-ENSAMBLAJE Y LIBERACION:

Se ensamblan los diferentes componentes constituyéndose así los nuevos virus que permanecen en la célula por algún tiempo y pueden observase al microscopio electrónico, a veces como cuerpos de inclusión, muchos virus pasan largos periodos en las células sin causarle daños, otros se liberan de la célula al poco tiempo.

La liberación se puede llevar a cabo a través de dos procedimientos:

  • LISIS CELULAR: la destrucción de la célula al salir los viriones rompiendo la membrana en forma masiva.

  • LA EXOCITOSIS O GEMACION: el virus atraviesa la membrana por sitios codificados por el virus, provocando una EVAGINACION, de esta manera arrastra componentes celulares de la membrana que constituirán la envoltura viral (virus envueltos).


GENETICA VIRAL

El análisis genético es muy importante para entender todos los procesos relacionados con los virus.
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