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TP Nº 3 TOMA Y REMISIÓN DE MUESTRAS

Enfermedades Infecciosas


Trabajo Práctico Nº 3

TOMA Y REMISIÓN DE MUESTRAS

Objetivos:
- Desarrollar los conceptos de la toma de muestras para remisión al laboratorio, la metodología de extracción de sangre en diversas especies, la toma y remisión de muestras para estudios bacteriológicos y virológicos, y acondicionamiento de las muestras.
Actividades:
- CUESTIONARIO GUÍA: Revisión de las respuestas elaboradas por el alumno del cuestionario presente en la siguiente guía.
I. CONTENIDOS TEÓRICOS SOBRE TOMA Y REMISIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
Los siguientes conceptos serán evaluados en la evaluación PARCIAL.
El siguiente texto ha sido adaptado de “ INSTRUCTIVO PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS AL LABORATORIO CLINICO VETERINARIO BIOVET S.A.S.”

1. TOMA Y REMISIÓN DE MUESTRAS: DESCRIPCION GENERAL
1.1 MATERIALES NECESARIOS PARA LAS MUESTRAS EN GENERAL
Para la toma de muestras se debe contar con una espacio apto para tal fin, en el cual el paciente ni el personal a cargo puedan llegar a salir lastimados, así como disponer de los implementos requeridos para la realización de una adecuada recolección de las muestras a analizar.

El material donde se toma la muestra en muchas ocasiones se convierte en determinante para que esta se altere. Hoy en el mercado se consiguen todos los elementos necesarios que garantizan esterilidad, conservación de la muestra, además de su fácil manejo en el campo y comodidad para el transporte.
Tubos al vacío para toma de muestra de sangre con anticoagulante (Fig. 1)
Los colores de los tapones son de convención internacional que aplica en todas las marcas.
 Tubos con EDTA, tapón lila, de capacidades 3.0 a 10.0 ml. Es el anticoagulante que mejor conserva las células y de mayor uso en todos los casos que se requieren exámenes de cuadro Hemático y Hemoparásitos.
 Tubos con Citrato de Sodio, tapón azul claro, de capacidades de 3.0 a 10.0 ml. Se usan cuando se requieren pruebas de coagulación y no se recomienda para cuadro Hemático y Hemoparásitos por la baja capacidad que tienen de conservar la morfología celular.
 Tubos con heparina, tapón verde. Se usan para realizar algunas pruebas inmunológicas que detectan antígenos. No se recomiendan para cuadro Hemático por la baja capacidad conservadora.
Tubos al vacío para toma de muestras de sangre sin anticoagulante (Fig. 1)
Por convención tienen tapón rojo, y vienen en capacidades de 3.0, 5.0, 7.0 y 10.0 ml. Estos tubos son de vidrio o plástico neutros protegido con silicona para evitar la hemólisis y facilitar la retracción del coágulo. Adicionalmente se pueden utilizar como recipiente estéril para muestras de bacteriología.
Pueden venir tubos de estas mismas características adicionados de un gel activador de coagulación o gel para separar el coágulo del suero sin necesidad de usar otro tubo.
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Figura 1: Tubos al vacío para toma de muestras de sangre. Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
Agujas
Agujas para toma de muestras con tubos al vacío (Fig 2). Normalmente agujas de calibre 20 G, color amarillo, 21 G color verde, 22 G color negro con longitudes de 1 pulgada, son adecuadas para toma de sangre en las distintas especies animales, a seleccionar de acuerdo con el vaso sanguíneo a puncionar.
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Figura 2: Agujas para toma de muestras con tubos al vacío. Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
Agujas hipodérmicas estériles y desechables (Fig. 3). Se consiguen en el mercado un amplio surtido ya sea por longitud (de 1/2 a 1 1/2 pulgadas) y calibres (18 a 30 G) Las más usadas son 18, 19, 20 y 21 con longitudes de acuerdo con la práctica de inyectología que se quiera manejar.
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Figura 3: Agujas hipodérmicas estériles y desechables. Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
Hisopos estériles
Son irreemplazables cuando se quiere tomar muestras para cultivo bacteriológico de secreciones, abscesos, órganos afectados y frotis para citología exfoliativa.
Hisopos con medio de transporte (Fig. 4). Hay presentaciones para bacterias aerobias, anaerobias y últimamente uno modificado que permite el aislamiento de estos dos grupos de microorganismos. Son los más indicados cuando la muestra demora más d e12 horas para llegar al laboratorio ya que el transporte se puede hacer a temperatura ambiente por el medio de cultivo que contiene, los microorganismos se mantienen viables sin permitir la proliferación de carga microbiana contaminante.
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Figura 4: Hisopos con medio de transporte Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
Hisopos secos (Fig. 5). Preparados en tubos de vidrio o plástico estériles, tienen aplicación similar a los anteriores pero por carecer de humedad y medio de cultivo, tienen poca capacidad para conservar la viabilidad de los microorganismos a pesar de que se mantengan refrigerados. Cuando al tomar la muestra se observa que el algodón queda prácticamente seco, se recomienda humedecerlo con solución salina fisiológica estéril para evitar la muerte bacteriana por desecación.
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Figura 5: Hisopos secos sin medio de transporte Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
Frascos de boca ancha y tapa hermética (Fig.6)

Por seguridad se prefieren los de material plástico a los de vidrio. Son útiles para la toma y manejo de muestras de materia fecal, orina e histopatología. Algunas marcas ofrecen material estéril que los hace útiles para estudios bacteriológicos. Frascos de capacidad de 30 a 100 ml son suficientes para manejar cualquier muestra.
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Figura 6: Frascos de boca ancha y tapa hermética Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.

Bolsas plásticas estériles con selle alambrado (Fig. 7)
Son útiles para toma de muestras de leche, tejidos para bacteriología y muestras de agua. Se consiguen en diferentes capacidades de acuerdo con las necesidades, por ejemplo las de dos onzas es la que más se utiliza para muestras de leche.
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Figura 7: Bolsas plásticas estériles Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.1 Materiales para muestras sanguíneas. (Fig. 8)
- Tubos de ensayo o Vacutainer tapa roja: para obtención del suero (química sanguínea, serologías)

Tapa azul: sangre con anticoagulante (citrato de sodio) para obtener

Plasma

Tapa lila: Sangre anticoagulada (EDTA) para obtener el plasma

- Chaqueta para Vacutainer

- Aguja para Vacutainer o aguja hipodérmica ( grandes animales Calibre 14 – 16 de 1 1/2pulgada, Pequeños animales calibre 18-22 de ½ a 1 pulgada de diámetro)

- Torniquete para uso en pequeños animales

- Guantes desechables por bioseguridad

- Alcohol

- Torunda de algodón


Figura 8: Materiales para muestras sanguíneas Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.2 Coprológico
- Guante de palpación para toma de muestra en grandes animales, no debe estar lubricado con alguna sustancia. Lo aconsejable es tomar la muestra arrastrando la mano por la mucosa intestinal.

- Guante de látex para bioseguridad en pequeños animales

- Frasco limpio con espátula (Fig 9.).
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Figura 9: Materiales para muestras coprológicas: Frasco limpio con espátula Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.3 Orina (Fig. 10)
- Guante de látex

- Frasco para colecta de orina.

- Sonda urinaria (pequeños animales).

- Jeringa.

- Gel lubricante.
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Figura 10: Materiales para muestras de orina Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.4 Raspados de piel (Fig. 11)
- Frasco estéril

- Hoja de bisturí

- Portaobjetos.

- Guantes de látex
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Figura 11: Materiales para muestras cutáneas Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.

1.1.5 Citologías (Fig. 12)
- Hisopos estériles.

- Especulo para pequeños animales.

- Laminas portaobjetos.

- Palillos, espátulas o cepillos.
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Figura 12: Materiales para muestras citológicas Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.6 Muestras para microbiología (Fig. 13)
- Para análisis contenido de vesículas o abcesos: agujas y jeringas para aspiración.

- Hisopos estériles para frotis.

- Medio de transporte Stuart.

- Frasco estéril.

- Laminas portaobjetos.

-Tinción de Gram.

- Guantes de látex estériles.

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Figura 13: Materiales para muestras microbiológicas Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.7 Serología (Fig. 14)
- Tubo de ensayo con tapa roja.

- Aguja hipodérmica.

- Guantes de látex.
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Figura 14: Materiales para toma de muestras para serología Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.1.8 Lavado bronco-alveolar
- Sonda (Fig. 15)

- 300 – 500 ml de solución salina fisiológica estéril

- Laminas portaobjetos

- Palillos o mondadientes

- 2 tubos estériles (1 tapa lila y 1 tapa roja)
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Figura 15: Sonda flexible de largo y calibre variable para toma de muestras bronco-alveolares. Fuente: María Victoria Esteban. Laboratorio Biovet.
1.2 TECNICA PARA TOMA DE MUESTRAS
1.2.1 SANGRE
Las muestras de sangre pueden tomarse para análisis hematológicos, para cultivos y/o para el examen directo de bacterias, virus o protozoos. La tabla 1 nos indica la forma de recolectar sangre y los materiales necesarios para cada una de las muestras a colectar.
Tabla 1. Materiales para pruebas hemáticas



X materiales que aplican para cada muestra
- Sitio de punción
El sitio de punción debe estar limpio y libre de patógenos, esto incluye recortar el pelo, lavarlo con jabón, detergente o solución yodada en dos veces y después realizar una limpieza con alcohol. El corte de pelo puede ser indeseable en animales de exhibición por lo que es necesario pedir el consentimiento del dueño, en caso que el corte no sea posible por algún motivo la limpieza debe ser más estricta. La asepsia debe realizarse en sentido contrario al crecimiento del pelo del animal y en forma circular del centro hacia la periferia. Después de la punción el sitio debe dejarse seco, limpio y libre de sangre ya que cualquier humedad o materia orgánica favorece las infecciones.
Bovinos
La sangre es obtenida de las venas yugular, mamaria (abdominal subcutánea) y caudales y de las arterias carótida, caudal y braquiales.
La vena yugular (Fig. 16) puede ser destacada presionando con los dedos el canal yugular. El vaso prominente se ve bien en la mayoría de las vacas lecheras y se palpa fácilmente en los animales obesos. Tiene aproximadamente 2 cm de diámetro. Se introduce en la vena una aguja larga calibre 14 – 16 y 2” de longitud, en un ángulo de 45 grados en dirección a la vena yugular. Extraída la sangre, se quita la presión sobre la vena y se aplica presión manual sobre la punción antes de sacar la aguja y por 30 a 60 segundos después para parar el sangrado.


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Figura 16: Vena yugular bovina y maniobra de extracción sanguínea yugular en bovino Fuente: Youtube.
La vena mamaria se punciona en forma semejante, cuidando el operador de ser pateado. También es más difícil de limpiar la piel, pero es innecesario destacar la vena en la mayoría de los casos.

La vena caudal o coccígea (Fig. 17) se encuentra muy cerca de la arteria, para realizar la punción se alza la cola y se clava una aguja pequeña calibre 20 ó 22 de 1” y a 15 cm de la base de la cola verticalmente en la línea media hasta que penetre en el bazo. Se debe identificar la sangre como venosa o arterial; ésta es más roja y sale con mayor presión.

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Figura 17: Maniobra de extracción sanguínea en vena caudal o coccígea bovina Fuente: Youtube.
Ovinos, caprinos
La vena yugular (Fig. 18) es la más usada pero la vena y arterias femorales son también fáciles de puncionar. Se hace una partición en la lana, a veces previamente cortada, para exponer un área de piel limpia. La yugular se encuentra con frecuencia debajo de la piel pero puede estar incluida en el tejido adiposo. La piel es blanda y la aguja (calibre 18-22 de 25 mm) entra con facilidad y frecuentemente atraviesa el vaso. Haciendo un poco de succión, la sangre penetrará en la jeringa si la aguja se encuentra en la luz del vaso.

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