Memorias uroanalisis y parasitologia laboratorio clinico




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fecha de publicación03.08.2016
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MEMORIAS UROANALISIS Y PARASITOLOGIA LABORATORIO CLINICO
UROANALISIS:

Se realizan los siguientes procedimientos:

  • Examen General de Orina ó Parcial de Orina.

  • Prueba de Clinitest


TIPO DE MUE STRA: Orina espontánea u Orina de 24 horas.
TOMA DE LA MUESTRA: Recolectada de forma espontánea, sonda vesical ó punción suprapúbica.

TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS: La muestra es estable 2 horas a una temperatura de 2-8ºC o 5 meses a -20ºC

RESPONSABLE: Paciente ó Auxiliar de Laboratorio – Bacterióloga.

PARCIAL DE ORINA
FUNDAMENTO
ORINA, líquido excretado por los riñones a través de las vías urinarias, con el cual se eliminan sustancias innecesarias para el organismo.

Desempeña un papel importante en la regulación del balance de líquidos y electrolitos y del equilibrio entre ácidos y bases. La cantidad de orina producida diariamente es de 1 a 1,5 litros, valor que aumenta si se ingieren muchos líquidos y disminuye en caso de sudoración intensa.

PROCEDIMIENTO

Coloque en tubo de ensayo o de centrifuga unos mililitros de orina, observe sus características físicas, Introduzca la tira reactiva de la casa comercial, saque la tira y escurra sobre papel absorbente compare los resultados con la carta de colores realice la lectura en un tiempo menor de l minuto. Centrifugue a 3500 r.p.m. durante lo minutos. Luego de este tiempo Decante el sobrenadante, mezcle el sedimento y coloque sobre lámina portaobjeto una pequeña gota, cúbrala con laminilla y observe en microscopio.
El estudio de esta muestra se compone de examen fisicoquímico y Microscópico.

EXÁMEN FÍSICO




  • ASPECTO: Es considerado como normal un aspecto transparente, pero es aceptado hasta un aspecto ligeramente turbio ya que este puede ser debido a contaminaciones. El aspecto de una orina turbia ya es considerado como anormal, esto puede ser debido a presencia de leucocitos, glóbulos rojos, bacterias, cristales, grasa




  • COLOR: En condiciones normales el color de la orina va de amarillo hasta ámbar. Se pueden encontrar colores anormales debido a la presencia de elementos anormales en la orina como por ejemplo sangre, medicamentos, alimentos y otros pigmentos.



  • Incolora: se conoce como HIDRURICA característica de una diabetes insípida se presenta por baja en la producción de Hormona antidiurética.

  • Rosado o Rojo: Se presenta por la presencia aumentada de Urobilinógeno, porfobilinógeno.

  • Azul: después de procesos quirúrgicos.




  • Amarillo intenso: pigmentos biliares.

  • Negro: melanomas productores de melanina.

EXAMEN QUIMICO

Este examen se hace por medio de una tira reactiva producida por diferentes casas comerciales.


  • pH: Es el reflejo de la capacidad del riñón para mantener la concentración normal de hidrogeniones. El pH normal va de 5.5 - 6.5. Influyendo el régimen dietético el cada paciente. En una alcalosis metabólica y respiratoria se produce una orina alcalina mientras que en una acidosis se produce una orina ácida.



  • Densidad: Esta varia en razón directa a la cantidad de sólidos, principalmente cloruros, urea, sulfatos, la densidad normal va de 1.015 - 1.025.



  • Proteínas: Se pueden encontrar varias clases de proteínas pero la más importante es la albúmina. Hay proteinurias llamadas fisiológicas asociadas a fiebres, exposición al frío, stress emocional, ejercicio intenso.



  • Hemoglobina: Es una proteína sanguínea que no se debe encontrar en orinas normales, su presencia puede ser causada por procesos hemolíticos, agentes tóxicos, accidentes transfusionales, quemaduras, etc. Fisiológicamente puede presentarse por ejercicio intenso. La presencia de hemoglobina y proteínas ambas altas indican que hay un daño glomerular



  • Glucosa: En condiciones normales se elimina por la orina cantidades no detectables por los métodos usuales, cuando el nivel de glucosa sobrepasa el umbral renal (180 mg/dl) se detecta. En el síndrome de Cushing se presentan glucosurias.



  • Cetonas: Cuando el metabolismo hepático se acelera por carencia de glucósidos, exceso de grasas o en diabetes, los cuerpos ce tónicos aparecen en abundancia en la orina y sangre. La prueba se basa en la reacción del ácido acetoacético con el nitraprusiato. La presencia aumentada de cetonas y glucosa se presenta en una acidosis diabética.



  • Bilirrubina y Urobilinógeno: La bilirrubina es un producto resultante de la descomposición de hemoglobina. Normalmente no se encuentra, su eliminación se presenta por ictericia obstructiva intra y extrahepática aguda o crónica, cirrosis. En Colestasis se presenta aumento de bilirrubinas con un

urobilinógeno normal, en ictericias hepáticas se presenta aumento de bilirrubinas menor que en las colestasis con un urobilinógeno aumentado o normal, en las ictericias producidas por anemias hemolíticas se presenta una bilirrubina normal con un urobilinógeno aumentado.

  • Nitritos: Se deben analizar en orinas recién emitidas para que su valor tenga algún significado clínico.

EXAMEN MICROSCÓPICO:
El examen microscópico del sedimento urinario no solo evidencia una enfermedad renal, sino también indica la clase de lesión presente.


  • LEUCOCITOS: Indican una pielonefritis, también se encuentran en enfermedades autoinmunes, lesión en vía renal o infecciones cerca al aparato urinario. Se debe tener en cuenta si la muestra está contaminada principalmente en mujeres en este caso el informe de laboratorio se debe reportar como: Contaminación vaginal, se siguiere recoger nueva muestra previo aseo y micción media.



  • HEMATÍES: Indican sangrado a nivel de vías urinarias. Se debe mirar si los hematíes son intactos los que son hematurias bajas, crenados que se observan en orinas hipertónicas, hematíes dimorfos que indican una hematuria glomerular.



  • CÉLULAS EPITELIALES: Se pueden encontrar algunas células en la orina como consecuencia del desprendimiento normal de las células envejecidas. Un marcado aumento puede indicar inflamación del conducto del tracto urinario. Los cuerpos ovales son células epiteliales redondas llenas de grasa que se observan en nefrosis debido a perdida de proteínas.



  • BACTERIAS : Microorganismo unicelular procarionte cuyas diversas especies causan la fermentaciones o putrefacciones en los seres vivos o en las materias orgánicas



  • CILINDROS: Se forman en la luz del túbulo renal, cuando las proteínas se precipitan originando un gel:

  • Cilindros hialinos: Son incoloros homogéneos y transparentes, se observan en una deshidratación y enfermedad renal, se pueden observar en condiciones normales.



  • Cilindros Eritrocitarios: Son cilindros en los que se ven glóbulos rojos, indican lesiones glomerulares.



  • Cilindros hemáticos: Se ven menos glóbulos rojos se encuentra la hemoglobina, son cilindros que microscópicamente se observan de un color rojo. También indican lesión glomerular.




  • Cilindros epiteliales: Se observan en necrosis tubular

.

  • Cilindros leucocitarios: Se observan en infección renal y procesos inflamatorios de causa no infecciosa.



  • Cilindros granulosos: Se observan en enfermedad renal significativa, también se observan después de ejercicio intenso.



  • Cilindros céreos: Se observan en infección renal crónica, hipertensión, neuropatía, inflamación y degeneración tubular, éxtasis urinaria alta.



  • CRISTALES: No tienen mayor significado clínico, solo en casos de trastornos metabólicos, se debe correlacionar su presencia con los hábitos alimenticios. Se forman cuando la orina después de recogida se deja por mucho tiempo sin analizar, por eso son importantes cuando se observan en orinas recién emitidas. Su formación se ha visto que tiene una correlación genética a formarlos.



  • Cristales de orinas ácidas:

  • Ácido úrico: Se encuentran en gota, estados febriles y litiasis. Microscópicamente se ven como un precipitado rosado.

  • Uratos amorfos: Se observan en estados de sudoración profunda, enfermedades febriles.

  • Cistina: Se observan en cálculos renales, son solubles en ácido clorhídrico e insoluble en ácido acético.

  • Tirosina: Aparecen en enfermedades hepáticas graves, formas graves de fiebre tifoidea y leucemias.

  • Leucina: En enfermedades hepáticas graves.





  • Cristales de orinas alcalinas:

  • Fosfato triple: En cistitis crónica, retención urinaria.

  • Fosfatos amorfos: En trastornos metabólicos, osteopatía.

  • Uratos de amonio: Son anormales solo si se encuentran en orinas recién emitidas.




  • HONGOS: Se observan en infecciones del tracto urinario, sobre todo en pacientes diabéticos pero pueden estar presentes por contaminación cutánea o vaginal en la orina.

ESPERMATOZOIDES: Se informan cuando se trata de muestras de hombres su elevación indica alteración de órganos reproductores.

MOCO: Se encuentra aumentado en procesos inflamatorios o irritación del tracto urinario.

PARÁSITOS: Se observan debido a contaminación fecal

FACTORES QUE INTERFIEREN

Interferencias que pueden producirse por algunos factores de la fase preanalítica en análisis del laboratorio clínico.

Estrés: glucosa, colesterol, proteínas transportadoras, factores de la coagulación y células sanguíneas (aumentan valores).


  • Ejercicios: glucosa, creatinina, CPK, HDL.




  • Ingestión de alcohol: glucosa, uratos y triglicéridos (disminuyen valores).



  • Hábito de fumar: glucosa, PTG, colesterol, HDL, amilasa y lipasa (aumentan valores).



  • Dieta rica en fosfatos y calcio: Aumenta los valores de calcio; y la rica en grasas, los de lípidos y bilirrubina. Glucosa en sangre, proteínas y cuerpos cetónicos (altos niveles): Pueden elevarlas concentraciones de creatinina en sangre (reacción de Jaffé). Interferencias que pueden producirse por algunos medicamentos.



  • Vitamina C: Creatinina y uratos (aumentan valores), glicemia y prueba de Benedict (disminuyen valores).


INFORME DE RESULTADOS:
Todas las estructuras que se encuentran en el sedimento se reportan de la siguiente manera:


POR CAMPO

POR CRUCES

Células epiteliales – Renales

Bacterias

Leucocitos

Cristales

Hematíes

Moco

Cilindros

Levaduras




Trichomonas

PROTEINURIA: Un examen de albúmina urinaria mide la cantidad de proteína en la orina. La proteína en la orina se examina por medio de uno de estos métodos:

Se utiliza una "prueba rápida" para ver si la proteína está o no presente en la orina. En este examen, una tirilla químicamente tratada se sumerge en una muestra de orina al azar, simplemente para ver si se detecta la proteína.

Se requiere una muestra de 24 h para medir la cantidad real de proteína que está siendo excretada en la orina.

Valores normales: Para una prueba rápida con tira reactiva, los valores normales son aproximadamente de 0 a 8 mg/dl. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios.

Para una prueba de 24 horas, el valor normal es menor a 2400 mg/por 24 h

MICROALBUMINURIA: Este examen busca una proteína llamada albúmina en una muestra de orina.

Forma en que se realiza el examen: Generalmente, se le solicita una pequeña muestra de orina mientras está en el consultorio médico. En raras ocasiones, se le pedirá que recoja su orina en la casa: durante 4 horas, durante la noche o durante 24 horas. Para hacerlo, usted utilizará un recipiente con tapa que el médico le entregará.

Valores normales: Normalmente, la proteína permanece en el cuerpo y poco o nada de ella aparece en la orina. Un resultado de menos de 30 microgramos por miligramo (mcg/mg) de creatinina es normal. Esto significa que sus riñones muy probablemente estén funcionando bien.

COPROLOGICO

FUNDAMENTO

Es uno de los exámenes más importantes y frecuentes utilizados para el diagnóstico de enfermedades parasitarias. El examen de heces desde el punto de vista parasitológico comprende:


  1. Examen macroscópico

  2. Examen microscópico.

EXAMEN MACROSCÓPICO O CARACTERISTICAS ORGANOLÉPTICAS:

Proporcionan datos de importancia clínica referentes a:

  • CONSISTENCIA: Normalmente las heces son blandas aunque moldeadas. Se observan heces extremadamente duras en el estreñimiento y líquidas por acción de purgantes, o por causas que originen diarrea. Esta consistencia puede ser: Líquida, blanda o dura.



  • COLOR: Normalmente las heces son de color pardo de diferente intensidad, este color se debe a la presencia de urobilina, varía de acuerdo a la ingestión de alimentos y medicamentos. Entre las enfermedades que originan alteraciones importantes en el aspecto y color están la hepatitis, la aquilia pancreática y la TBC intestinal que dan heces acólicas o de arcilla. Las hemorragias intensas del estómago (gastritis erosivas) o del intestino superior dan a las heces un aspecto negruzco viscoso (melenas), si la hemorragia se origina en un lugar cercano al recto, el color de las heces varía del pardo al rojo vivo.



  • REACCIÓN: Normalmente es neutra pH 6.9 – 7.2. También dependen del régimen alimenticio. En situaciones patológicas es alcalina cuando hay diarrea bacteriana y ácida, cuando la diarrea es viral. Los niños si el pH 6.0 o menos y si está tomando leche orienta a pensar en deficiencia de disacáridos y en rotavirus cuando es simultáneamente acuosa con vómitos y fiebre.



  • CANTIDAD: Normalmente un adulto elimina 100-250grs; que equivale a la séptima parte de alimentos ingeridos. También depende del tipo de alimentación, absorción intestinal, funcionamiento biliar y pancreático, edad del paciente y hábitos.



  • COLOR: Es producido por la presencia de sustancias aromáticas (indol-escatol) que se derivan de la desanimación y descarboxilación del triptofano. El olor se aumenta de acuerdo a la cantidad de carne ingerida, es menos intenso en dietas vegetarianas. Un olor amoniacal orienta a insuficiencia renal o fístula recto- vesical, olor a cola de carpintero se presenta en la disentería amebiana y a huevos podridos en la salmonelosis.



  • MOCO: Normalmente se encuentra en pequeñas cantidades; indican inflamación o irritación del intestino especialmente del colon y recto en grandes cantidades.

EXAMEN MICROSCÓPICO

Se realiza un examen directo utilizando solución salina normal y lugol.

MATERIALES

  • Láminas portaobjetos

  • Láminas cubreobjetos

  • Palillos o aplicadores de madera

  • Solución salina

  • Solución yodad de lugol

  • Muestra de materia fecal

  • Microscopio.

PROCEDIMIENTO

  • En un portaobjeto coloque una gota de solución salina en un extremo y una gota de lugol en el otro.



  • Con un palillo tome una pequeña porción de la muestra, si la muestra contiene moco o si son líquidas, tome la porción indicada del moco sanguinolento o del líquido que lo rodea. Si están bien formadas tome la muestra de la profundidad y de la superficie.



  • Mezcle la porción tomada de la muestra con la gota de la solución salina que se ha depositado en el portaobjeto hasta obtener una emulsión homogénea.



  • Con otro palillo tome otra porción de la muestra y mézclela con la gota de lugol.




  • Si queda un material sin homogenizar retírela con un palillo.




  • Coloque un cubre sobre cada gota, evitando que quede burbuja en la preparación.



  • Examine la preparación en el microscopio. Primero utilizando objetivo de 10X Y aquellas formaciones que sean sospechosas, se pasa a observan con el objetivo de 40X. La solución salina se utiliza para la investigación de todos los parásitos intestinales y de sus formas derivadas (trofozoitos, huevos, larvas) y el lugol se observan los quistes de los protozoarios y los huevos se colorean detallando sus estructuras, los núcleos se ven bastante bien.



  • Examine los campos microscópicos en forma zigzag.

ESTRUCTURAS OBSERVADAS

FIBRAS VEGETALES: Tienen forma espiral o señales reticuladas que presentan.

CÉLULAS VEGETALES: Presentan un doble contorno y cuerpos clorofílicos.

PELOS VEGETALES: Posee paredes muy refringentes y homogénea, posee un conducto centra que recorre su longitud.

ALMIDONES: Tienen formas irregulares y son refractiles al agregar el lugol. En solución salina se presentan incoloros e irregulares, con el lugol toman coloración azul cuando están sin digerir y un color rojo o morado cuando están parcialmente digeridos.

FIBRAS MUSCULARES: Son amarillas, cuando están mal digeridas aparecen como cilindros cortos con estrías transversales y sus extremos romos, con la eosina toman color rojo y se destacan claramente.

GRASAS: Se presentan en tres formas:

Grasas neutras: existen en poca cantidad, aparecen como góticas redondas de diferentes tamaños, transparentes, con bordes netos de color negro y se tiñen con el lugol de color amarillo claro.

Ácidos grasos: toman la forma de copos, como la de las grasas neutras o cristales semejantes a gujas que están agrupadas.

Jabones: se presentan como amorfos amarillos o masa redondeados parecidos a huevos de parásitos. Provienen de la saponificación de las grasas del intestino.

CRISTALES: tienen diferente morfología. Es muy poca su significación clínica. Los de fosfatos triples tienen forma de ataúd, los de oxalato de calcio se parece a un sobre de carta y los de charcot leyden tienen forma de agujas y los de colesterina se parecen a una escalera.

En el examen microscópico también podemos observan células epiteliales, leucocitos, eritrocitos.

PARASITOS:

NEMATODOS: Gusanos redondos

  • Ascaris lumbricoides: Se observan huevos miden aprox. 45-75 x 30-50 mm, presenta una célula rodeada por tres capas, producen una patología de dolor de estómago y desnutrición.

  • Tricocéfalo: Trichuris trichiura. El huevo mide de 50-55 x 22-25 mm Tiene la forma de balón de fútbol americano, produce anemia intensa, dolores abdominales, prolapso rectal ocasional.

  • Uncinarias: Tienen una forma elíptica, están cubiertas de una membrana lisa, transparente y fina, mide de 60 - 40 x mm producen anemia.

  • Strongyloides stercolaris: Se observan larvas. Produce diarrea, vomito, desnutrición.

  • Enterobius vermiculares (Oxiuros): Los huevos son ovoides con una cara convexa y una plana, presenta una membrana interna y delicada y otra gruesa hialina y mamelonada, mide de 50-60 x 20-30 mm. Produce prurito en la región perianal, insomnio, cambios de conducta.

CESTODOS: Gusanos planos

  • Taenia sp: Los huevos miden 20-30 x 30-40 mm, son ovoides con membrana gruesa, amarillenta que se encuentra estriada en forma de empalizada y encierra un embrión de seis ganchos poco visibles. Produce trastornos nerviosos.

  • Hymenolepis nana: Huevos ovoides, mide aprox. 50 mm tiene una membrana interna y una externa, también puede causar trastornos nerviosos.


PROTOZOARIOS: Amebas


  • Entamoeba histolytica: Se observan quistes miden aprox. 20 mm se observa con cuatro núcleos. Pueden causar lesión de la mucosa intestinal.

  • Entamoeba coli: Son quistes más grandes que los de E. histolytica, tiene más de cuatro núcleos. Es considerada como NO patógena.

  • Endolimax nana: Los quistes son ovalados miden de 6 - 10 mm presentan de uno a cuatro núcleos.

  • Iodamoeba bütschlii: Su quiste se caracteriza por la presencia de una vacuola de yodo, no es una ameba patógena.

  • Gardia lamblia: Es una ameba en forma de pera simétricamente lateral, con un extremo ancho y redondeado, el quiste presenta cuatro núcleos y dos cuerpos parabasales, produce una diarrea amarillenta y vomito.


TREMATODOS: Forma de hoja plana


  • Fasciola hepática: Daño en hígado. quistes

7. INFORME DE RESULTADOS

Algunos laboratorios clínicos informan el resultado de sus coprológicos por cruces. Se ha sugerido de alguna utilidad en la evaluación de quistes y trofozoitos por cruces como lo sugiere la siguiente tabla:

CANTIDAD QUISTES/TROFOZOITOS

CRUCES

1 – 15 (Quistes/TROFOZOITOS)

+

16 – 25 (Quistes/TROFOZOITOS

++

26 – 35 (Quistes/TROFOZOITOS

+++

Más de 36 (Quistes/TROFOZOITOS

+++

Recuento de leucocitos: Se debe informar en que cantidad se encuentran por campo, indican principalmente infección bacteriana. Si se observan más de 10 leucocitos por campo, se hace una lámina y se colorea con Wright, se hace el recuento diferencial y si hay mayor cantidad de neutrofilos la infección es causada por bacterias, si hay mayor cantidad de no segmentados la infección es de tipo viral.

EXAMEN COPROSCÓPICO


FUNDAMENTO

Su valor depende de la rapidez con que se examine la muestra, por esto es importante procesar la materia fecal recién evacuada. El coproscópico incluye además del examen coprológico los siguientes parámetros:

  • pH: Se emplea una tira de papel indicador universal, sobre el cual se aplica una pequeña cantidad de materia fecal, se espera unos minutos y se compara con la escala de colores.




  • Azúcares Reductores: Se realiza con las pastillas Clinitest, las cuales reaccionan con una cantidad suficiente de cualquier sustancia reductora de las heces como glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, etc.

El pH y los azúcares reductores son de gran importancia en diarrea de infantes, especialmente cuando hay intolerancia de carbohidratos o una mala absorción de los mismos.

  • Sangre oculta en materia fecal: El paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, chorizos, morcillas (rellenas), etc., durante por lo menos tres (3) días antes del examen. La muestra de materia fecal recolectada no debe haberse expuesto a contaminación con orina. Las muestras seriadas durante algunos días, aumentan la exactitud del examen. Generalmente se obtienen resultados falsos positivos en pacientes con hemorroides.



PROCEDIMIENTO:

PH

  • Tome una pequeña cantidad de materia fecal y colóquela en un tirilla de indicador de PH y deje reaccionar unos segundos, de tal manera que la tirilla cambia de color.

  • Compare el color final obtenido con las escala de colores de la casa comercial usada del indicador de PH.

AZUCARES REDUCTORES:

  • En tubo de centrífuga agregue un 2 ml de solución salina, con ayuda de un palillo tome una porción de muestra de materia fecal y dilúyala.

  • Agregue una pastilla de clinitest a la mezcla, espere unos segundos mientras ocurre la reacción exotérmica luego compare el color obtenido con la carta de colores de la casa comercial (Negativos: Azul; Positivos: Desde verde a Naranja).

SANGRE OCULTA O GUAYACO:

Coloque sobre una lámina portaobjeto una tira de papel filtro y esparce sobre este un cantidad pequeña de materia fecal.

Sobreponga la pastilla de hematest en la muestra anterior y adiciones una gota de solución salina espere que reaccione por un minuto.

Observe el color obtenido (Negativo: No toma color, Positivo: azul, alrededor de la pastilla)

Recomendaciones:

  1. El paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, chorizos, morcillas (rellenas), etc., durante por lo menos tres (3) días antes del examen.

  2. La muestra de materia fecal recolectada no debe haberse expuesto a contaminación con orina.

  3. Las muestras seriadas durante algunos días, aumentan la exactitud del examen.

Generalmente se obtienen resultados falsos positivos en pacientes con hemorroides.

  • Prueba de la cinta pegante o adhesiva (PRUEBA DE GRAHAM): Procedimiento recomendado en la investigación de oxiuros (Enterobius vermicularis).

Colocar cinta adhesivo en la región perianal del paciente (Método de especial utilidad en niños). Dado que la hembra del parásito deposita los huevos en las horas de la noche y en la región perianal, aplicar la cinta adhesiva antes de acostarse y retirarla por la mañana, antes de que el paciente se levante de la cama.

Presionar la superficie adherente de la cinta sobre una lámina portaobjetos de vidrio. Continuar con el procedimiento de observación al microscopio.

TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN (ÁCIDO-RESISTENTE) MODIFICADA:

Esta técnica es útil en la identificación de ooquistes de coccidios como cryptosporidium, Isospora, y Cyclospora, que son difíciles de detectar con colorantes rutinarios. Esta tincion de Ziehl-Neelsen Modificada no require el calentamiento de los reactivos al teñir.

Especimen:

Puede utilizarse el sedimento concentrado, de heces frescas o preservadas en formalina.

Reactivos para la tinción: Se efectúan cuatro pasos en el proceso, con diferentes reactivos:

  • Metanol Absoluto

  • Alcohol Acido: 10 ml de acido Sulfurico + 90 ml de etanol Absoluto. Almacene a temperatura ambiente.

  • Carbol fucsina

  • Verde de Malaquita al 3% : disuelva 3 g de verde de malaquita en 100 ml de agua destilada. Almacene a temperatura ambiente.

Procedimiento de la tinción:

  • Preparar un frote con 1 a 2 gotas del espécimen fecal sobre un portaobjetos y secar en una platina caliente a 60°C. Los frotes no deben quedar demasiado gruesos.

  • Fijar con metanol absoluto durante 30 segundos. Teñir con carbol Fucsina por un minuto.

  • Lavar con agua destilada brevemente y escurrir.

  • Decolorar con alcohol- ácido durante 2 minutos. Enjuagar con agua destilada y escurrir.

  • Teñir con el colorante de contraste verde de malaquita durante 2 minutos.

  • Lavar brevemente con agua destilada y escurra.

  • Secar el portaobjetos sobre una platina caliente a 60 °C durante 5 minutos.

  • Montar la preparación con un cobreobjetos usando un medio de montaje.

  • Examinar 200 a 300 campos usando el objetivo seco fuerte 40× .

  • Para confirmar la morfología interna, use el objetivo de aceite de inmersión 100x


RUTH ELIANA RINCON ROJAS

BACTERIOLOGA DOCENTE

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