Manual de prácticas de laboratorio




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2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de linfocitos atípicos.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
3.1 Equipo de Laboratorio

Microscopio de Luz
3.2 Materiales de Laboratorio


CANTIDAD

DESCRIPCIÓN

1

Frotis de sangre periférica teñido con Wright



4. PROCEDIMIENTO.

Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.

ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________

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SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 12

EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.P. CON LINFOCITOS PLASMOCITOIDES”
1.INTRODUCCIÓN.
Una de las formas en que se presenta el linfocito atípico, comparte rasgos con la célula plasmática, la cual no es encontrada normalmente en sangre periférica. Ambas tienen un citoplasma azul muy intenso y pueden medir de 15-20 µ .Los dos pueden distinguirse por su patrón de cromatina nuclear. En el linfocito " plasmacitoide ", el núcleo tiene una apariencia abierta y laxa y tiene un color rojo-púrpura más tenue. Pueden verse también nucleolos. Esto es en contraste con la apariencia amontonada, abultada del núcleo de la célula plasmática y su localización excéntrica dentro de la célula. No hay una área clara perinuclear en el linfocito plasmacitoide como la hay en la célula plasmática.

Los linfocitos plasmocitoides son comúnes de encontrar en ciertas enfermedades virales como el dengue y las enfermedades exantemáticas de la infancia.


2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

Se analizarán muestras que tengan el hallazgo de linfocitos plasmocitoides.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
3.1 Equipo de Laboratorio

Microscopio de Luz
3.2 Materiales de Laboratorio


CANTIDAD

DESCRIPCIÓN

1

Frotis de sangre periférica teñido con Wright



4. PROCEDIMIENTO.

Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.
ACTIVIDADES.

- Reporte de resultados .______________________________________________________

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SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 13

EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.P. CON HIPERSEGMENTACIÓN NUCLEAR EN NEUTRÓFILOS”
1.INTRODUCCIÓN.
Los núcleos de los neutrófilos normalmente tienen de dos a cinco lóbulos nucleares.La mayoría tendrán dos ó tres. Si existe un aumento en las células con cuatro ó cinco lóbulos, el observador debería buscar cuidadosamente células con más de cinco lóbulos.La presencia de una sola célula con seis distintos lóbulos nucleares, puede tener significancia clínica. Por otro lado, si más del 5% de los neutrófilos tienen cinco lóbulos ó si la mayoría tienen cuatro, ésto también puede ser un hallazgo importante.

Los neutrófilos hipersegmentados son la indicación más temprana en sangre periférica de anemia megaloblástica ( por deficiencia de vitamina B12 ó de folatos ), y es importante que se reporten. Cuando menos deben identificarse seis lóbulos distintos para que la célula sea identificada como hipersegmentada.En casos severos, pueden encontrarse células con nueve lóbulos ó aún más.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

Se analizarán muestras que tengan el hallazgo de hipersegmentación nuclear en neutrófilos
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
3.1 Equipo de Laboratorio

Microscopio de Luz
3.2 Materiales de Laboratorio

CANTIDAD

DESCRIPCIÓN

1

Frotis de sangre periférica teñido con Wright



4. PROCEDIMIENTO.

Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.

ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________

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SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 14

ESTUDIO DE MÉDULA ÓSEA”
1.INTRODUCCIÓN.
El estudio medular es un procedimiento especializado de gran utilidad clínica. Puede ser realizado tanto por aspirado (mielograma) como por biopsia percutánea según las características clínicas del paciente y el diagnóstico presuntivo. El estudio medular permite identificar las diferentes series hematopoyéticas, estudiar el estroma medular y obtener material para estudios bacteriológicos, micológicos, de citometría de flujo y genéticos entre otros.

La decisión de solicitar un estudio de médula ósea debe basarse en la hipótesis de que los hallazgos que se esperan del estudio justifiquen someter al paciente al riesgo y la molestia, a pesar de éstos ser mínimos.

Los hallazgos medulares esperados (o inesperados) en parte dependen del cuadro clínico, de los hallazgos en sangre periférica y de la información que se requiere en algunos casos específicos. En la actualidad el estudio medular hace parte integral del estudio sistematizado de un importante número de enfermedades hematológicas, infiltrativas y neoplásicas que están bien protocolizadas. Debido a que el aspirado de médula ósea está virtualmente libre de riesgo (excepto si se hace en el esternón) y que la biopsia medular es un procedimiento invasivo mínimo, el estudio se recomienda en todos los casos en donde se pueda justificar un probable beneficio con la información obtenida.
Estudio medular .

El tipo de procedimiento utilizado para el estudio de la médula ósea (aspirado, biopsia o ambos), depende de la sospecha clínica. En términos generales se plantean cuatro posibilidades:

Compromiso de precursores hematopoyéticos con alteraciones citológicas, como en las anemias y leucemias. En estos casos, está mejor indicado el aspirado medular o mielograma.

Compromiso de las estructuras de soporte del tejido hematopoyético o del mismo hueso como en la mielofibrosis, metástasis o granulomas, o que haya disminución del tejido hematopoyético y se requiera determinar con certeza la celularidad, como en la anemia aplástica. En estos casos está mejor indicada la biopsia medular.

Fiebre de origen desconocido, en donde se debe solicitar un estudio de aspirado y biopsia.

Sospecha clínica o se desee estudiar una enfermedad infecciosa por bacterias, micobacterias y hongos. En estos casos, se debe solicitar estudio de cultivos de material medular obtenido por aspirado.

Algunos pacientes con coagulopatía (especialmente los hemofílicos) requieren terapias de reemplazo para hacer el procedimiento cuando está indicado hacer el estudio.

Como la médula ósea es un tejido blando, se pueden obtener muestras introduciendo una aguja adecuada en la médula y aspirando con jeringa. Los sitios donde se puede obtener médula ósea en los adultos y niños mayores de un años son: el esternón, las espinas ilíacas superiores anterior o posterior; la cresta ilíaca y las apófisis espinosas de las vértebras.

La punción esternal, hasta donde sea posible, no se debe hacer de rutina, debido al riesgo de lesión cardiovascular.

En niños menores de un año se puede tomar material medular por aspirado en el tubérculo tibial. A partir del primer año de vida se toma similar a la del adulto.
Procedimientos especiales en el material medular

Las muestras de médula ósea son coloreadas con Wright cuando son obtenidas por aspiración y con hematoxilina-eosina, cuando es por biopsia; de acuerdo con los resultados obtenidos el hematólogo apoyado en los hallazgos de sangre periférica y en el examen físico, puede recurrir que tipo de procedimientos especiales están indicados para confirmar el diagnóstico.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .


    1. Principio.

Los extendidos de médula ósea se colorean con Wright siguiendo la técnica usual. Inicialmente son observados macroscópicamente para determinar la presencia de partículas. Luego el extendido es examinado en bajo poder (10X) para apreciar la relativa cantidad de grasa y de contenido celular hematopoyético de acuerdo al cual la médula se puede clasificar como: hipocelular, normocelular e hipercelular.

Después de la observación en 10X el extendido se examina con objetivo de 100X localizando los campos donde se hallan las partículas y se procede al análisis de las células sanguíneas que habitan en la médula ósea. Se establece la relación del número de las células blancas frente al número de células rojas nucleadas. Esta proporción se denomina “relación mielo - eritroide” (M:E). Para estimar esta relación es necesario la identificación y tabulación de 300 - 500 células nucleadas. Se observa aumento en la relación mielo-eritroide, cuando se aumentan los precursores mieloides como sucede en los procesos inflamatorios agudos, leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la insuficiencia renal crónica. Una disminución en la relación mielo-eritroide se presenta cuando se disminuyen los precursores mieloides como en la anemia aplástica o cuando aumentan los precursores eritroides como en las anemias hemolíticas y megaloblásticas.

En forma simultánea se realiza una valoración cuidadosa de la morfología de las diferentes líneas celulares: serie eritroide, granulocítica, linfoide, monocítica, megacariocítica, células plasmáticas y otras células.


    1. Metodología



Estudio de Médula Osea

El estudio de médula ósea, comprende los siguientes aspectos:


2.2.1 Seco Débil ó 10X.

  • Celularidad Global, Ausencia ó Aumento del No. De Células grasas y/ó megacariocitos.

  • Celuraridad Hematopoyética

-Normal

-Aumentada: hiperceluraridad

-Disminuída: hipoceluraridad ó aplasia.
2.2.2 Examen a Gran Aumento ó 100X.
2.2.2.1 Recuento Global:

Serie Granulocítica con predominio:mielocitos y metamielocitos : 60%.

Serie Eritrocítica: Predominio: Policromatófilos y Ortocromáticos. 20%.

Serie linfoide, Monocítica y Megacariocítica: 20%.

2.2.2.2 Características Morfológicas:

-Aumento de Mieloblastos

-Aumento de Linfocitos ó células plasmáticas

-Basofilia, Eosinofilia, aumento de células Cebadas ó de Macrófagos.

-Megacariocitos: hipo ó hipersegmentación nuclear; alteraciones de la madurez citoplásmica, megacariocitos de tamaño muy pequeño.

-Serie Eritoide con cambios Megaloblásticos ó diseritropoyesis.

-Presencia de células no hematopoyéticas: células metastásicas.

2.2.3 Reporte del Mielograma y Valores Normales.

LÍMITES DE NORMALIDAD (%)
Serie Blanca 50.4-70.3

Mieloblastos 0.2-1.5

Promielocitos 2.1-4.1

Mielocitos 8.4-17.0

Metamielocitos 10.0- 26.8

Bandas + segmentados 15.7 -31
Serie Roja

Proeritroblastos 0.2-1.3

Eritroblastos Basófilos 0.5-2.4

Eritroblastos Policromáticos 17.9-29.2

Eritroblastos Ortocromáticos 0.4-4.6
Linfocitos 11.1-23.1
Basófilos y Células Cebadas 0-0.2
Megacariocitos 0-0.4
Monocitos + macrófagos 0-0.8
Plasmocitos 0.4-3,9
Relación Mieloide-Eritroide 1.5-3.3

3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
3.1 Equipo de Laboratorio

1 Microscopio de Luz

3.2 Material de Laboratorio

CANTIDAD

DESCRIPCIÓN

1

Laminillas y/ó diapositivas con muestra de aspirado de médula ósea


4.PROCEDIMIENTO.

Observar las laminillas ó diapositivas y reportar el mielograma de acuerdo con el formato que aparece en el reporte de resultados.

ACTIVIDADES.

-Observación de laminillas y/ó diapositivas con imágenes de aspirados de médula ósea normal .

-Reportar un mielograma normal.


R E P O RT E D E M I E L O G R A M A

Serie Blanca




Mieloblastos




Promielocitos




Mielocitos




Metamielocitos




Bandas + segmentados





Serie Roja



Proeritroblastos




Eritroblastos Basófilos




Eritroblastos Policromáticos




Eritroblastos Ortocromáticos




Linfocitos




Basófilos y Células Cebadas




Megacariocitos




Monocitos + macrófagos



Plasmocitos




Relación Mieloide-Eritroide




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