Examen físico




descargar 187.06 Kb.
títuloExamen físico
página2/4
fecha de publicación24.02.2016
tamaño187.06 Kb.
tipoExamen
b.se-todo.com > Química > Examen
1   2   3   4

EXAMEN QUÍMICO DE EXUDADOS


A) Determinación cualitativa y cuantitativa de proteínas

B) Determinación de glucosa

      1. Determinación de cloruros

      2. Determinaciones de lípidos

      3. Determinación de calcio




    1. DETERMINACION CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE PROTEÍNAS


La determinación de proteínas en los exudados se efectúan por los diferentes métodos existentes para orina y/o suero sanguíneo. Debido a que los exudados contienen una alta concentración de proteínas es conveniente realizar una dilución previa de los mismos (1:10) con solución salina isotónica, multiplicándose el resultado obtenido por el factor de dilución.

En los exudados purulentos consecutivos a inflamaciones graves en los que hay formación o derrame de pus como en el caso de empiema, la proteína total de la porción serosa sobrepasa por lo regular los 3 g % y llega a ser aproximadamente igual que en el plasma sanguíneo. En los exudados consecutivos a procesos inflamatorios de menor intensidad la proteína total es por lo general de 0.l a 0.5 g %.
REACCIÓN CUALITATIVA DE RIVALTA PARA MUCOPROTEÍNAS

FUNDAMENTO.

Se basa en el principio de desnaturalización de las proteínas en presencia de un ácido débil.
REACTIVOS

  1. ÁCIDO ACÉTICO GLACIAL G.R.

  2. AGUA DESTILADA


MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIÓN

  • MATERIAL PARA LA PRUEBA




2

tubos de ensaye de 15 x150 mm

1

pipetas lineales de 10 ml


1

pipetas lineales de 0.2 ml (1/10)


1

pipeta Pasteur con bulbo




gradilla



TECNICA

  1. Coloque en un tubo 5 ml de agua destilada agregar 0.01 ml de ácido acético glacial y completar con agua destilada a los 10 ml. Mezclar por inversión. Sobre esta solución se dejan caer unas gotas (5 a 10) del líquido y se observa cuidadosamente, la formación de una nubécula parecida al humo de un cigarrillo. La intensidad de turbidez se expresa en cruces.


VALOR DE REFERENCIA

En los exudados se forma una nubécula por lo que el resultado es positivo. Y en general en los trasudados la prueba es negativa.


    1. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA


La cuantificación de glucosa en exudados se hace igual que en las técnicas descritas para suero y/o sangre completa. La glucosa en los exudados existe en cantidades muy bajas comparado con la concentración de glucosa sanguínea, esta disminución obedece a que la glucólisis es continua por la acción de las bacterias y células; dependiendo hasta cierto punto de la gravedad del proceso inflamatorio.
TÉCNICA

Revisar la técnica disponible

.

B) DETERMINACIÓN DE CLORUROS

La determinación de cloruros se hace igual que en el plasma o suero. La concentración de cloruros es menor en los exudados que en los trasudados pero muy parecida a la del plasma sanguíneo. El grado de disminución depende del aumento de proteínas, de acuerdo con las leyes que regulan la concentración de las sustancias fácilmente difusibles a través de una membrana semipermeable.

TÉCNICA

Revisar la técnica disponible

    1. DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS Y CALCIO

Los procedimientos para la cuantificación de lípidos y Calcio son los mismos que en suero sanguíneo. Puede haber en los exudados grasas neutras y ácidos grasos. La colesterina se presenta sobre todo en los exudados retenidos en las cavidades durante mucho tiempo. Probablemente la presencia de esta sustancia se deba a las alteraciones degenerativas que ocurren en el contenido de los exudados o de la cubierta serosa de los mismos.

La determinación de Calcio es una prueba que nos ayuda a diferenciar los exudados de los trasudados. En los exudados la concentración del calcio es mayor que en los trasudados, como consecuencia de la fracción no difusible del calcio que está combinada con las proteínas. Esto es válido también para la concentración de magnesio a causa del incremento de la concentración de las proteínas.
TÉCNICA

Revisar las técnicas disponibles


EXAMEN MICROSCÓPICO


    1. OBSERVACIÓN DIRECTA (muestra en solución salina)

    2. PREPARACIONES TEÑIDAS (con tinciones hematológicas y bacteriológicas)

REACTIVOS.

  1. COLORANTE PARA TINCIÓN DE MAY – GRUENWALD GIEMSA

  2. COLORANTE PARA TINCIÓN DE WRIGHT

  3. SOLUCIÓN BUFFER DE FOSFATOS PARA TINCIÓN DE WRIGHT

  4. CITRATO DE SODIO

  5. ACEITE DE INMERSIÓN EN FRASCO GOTERO

  6. SOLUCION SALINA


MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIÓN

  • MATERIAL PARA LA PRUEBA




1

tubo de ensaye de 13 x 100 mm con anticoagulante estéril

1

pipeta Pasteur con bulbo

5

portaobjetos

5

cubreobjetos




gradilla, perilla





puente de tinción




aplicadores de madera




papel Parafilm




  • INSTRUMENTACIÓN

Microscopio binocular con iluminación Koheler

TÉCNICA.

  1. OBSERVACION DIRECTA ó EN FRESCO

La observación directa “en fresco” se realiza a los exudados de origen vaginal, uretral, prostático y de lesiones chancroides, obteniéndose de manera especial para cada caso, por medio de hisopos, pipetas Pasteur ó capilares (chancro) depositando la muestra en el tubo de ensaye con solución salina. La observación microscópica se hace de una preparación entre portaobjetos y cubreobjetos de la muestra homogeneizada en solución salina, primero se observa con objetivo seco débil y luego con seco fuerte para investigación de parásitos, hongos, espiroquetas, predominio de flora bacteriana, etc.



  1. OBSERVACION MICROSCOPICA DE MUESTRAS TEÑIDAS


I) TINCIONES HEMATOLÓGICAS

        1. Depositar una pequeña gota de material a estudiar sobre el portaobjeto limpio y seco.

        2. Hacer un extendido delgado tipo hematológico o bacteriológico.




        1. Dejar secar y teñir con la técnica de May – Gruenwald Giemsa para efectuar la diferenciación celular.

        2. Puede teñirse con Wright, Papanicolaou, etc.

Es conveniente agregar citrato sódico a la muestra biológica para evitar coagulación.
II) TINCIONES BACTERIOLOGICAS

Se usan las tinciones Gram y Ziehl – Neelsen para teñir los frotis.

REACTIVOS

  1. TINCION DE GRAM

CRISTAL VIOLETA

LUGOL

ALCOHOL-ACETONA

SAFRANINA

2. TINCION DE ZIEHL NEELSEN (BAAR)

FUCSINA FENICADA

ALCOHOL ÁCIDO

AZUL DE METILENO
MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIÓN

  • MATERIAL PARA LA PRUEBA



1

tubo de ensaye de 13 x1200 mm estéril con anticoagulante

1

pipeta Pasteur con bulbo

5

portaobjetos

5

cubreobjetos




gradilla,





puente de tinción




aplicadores de madera




papel Parafilm



  • INSTRUMENTACIÓN

Microscopio binocular con iluminación Koheler
TINCION DE GRAM

1. Se prepara el extendido bacteriológico y se deja secar al aire, se fija por calor suave sobre a la flama de un mechero Bunsen y luego pasadas a través de ella (debe tenerse cuidado para evitar calor excesivo, que altere morfología bacteriana).

2. La preparación se coloca en un puente de tinción y se cubre con cristal violeta tiñendo por un minuto, se escurre.

3. Se cubre con lugol por un minuto, se escurre y se decolora con alcohol acetona en 2 tiempos de 15 segundos cada uno enjuagando entre ellos con agua de la llave (para no exceder la decoloración), se contratiñe con zafranina de 30 a 60 segundos. Se escurre se enjuaga con agua, se deja secar y se observa al microscopio con objetivo de inmersión.
TINCION DE ZIEHL NEELSEN

1. Se efectúa un extendido delgado del material a teñir, sobre un portaobjetos NUEVO, se deja secar al aire y se fija a la flama.

2. Se coloca sobre un puente, se cubre con solución de fucsina fenicada y se calienta suavemente hasta emisión de vapores dejando actuar por 5 minutos calentando varias veces, reponiendo el colorante que se pierda por evaporación.

3. Se lava con agua, se decolora con alcohol acido hasta que el extendido tome un color rosa pálido, se neutraliza con agua de la llave.

4. Se cubre con azul de metileno por 1 minuto, se escurre, se lava con agua, se deja secar y se observa con objetivo de inmersión.
TÉCNICA

  1. Seguir los procedimientos habituales de cada tinción y observar las preparaciones con aceite de inmersión en el microscopio.

  2. Al término de la observación asegúrese de dejar limpios los objetivos y la platina. Así como colocar en posición de transporte segura el microscopio.


PRÁCTICA No. 7

ANÁLISIS DE TRASUDADOS. 5, 9, 11, 12

1   2   3   4

similar:

Examen físico iconExamen físico

Examen físico iconExamen físico

Examen físico iconExamen físico

Examen físico iconExamen físico

Examen físico iconExamen fisico

Examen físico iconExamen físico

Examen físico iconExamen físico

Examen físico iconExamen Físico General 7

Examen físico iconExamen físico, incluyendo

Examen físico iconExamen recuperacion biologia grado noveno segundo periodo enero 23 cuarto examen




Todos los derechos reservados. Copyright © 2019
contactos
b.se-todo.com