U niversidad Autónoma del Estado de México
descargar 90.79 Kb.
|
 U  niversidad Autónoma del Estado de México Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia  PROTOCOLO DE TESIS. Tasa de preñez en ovejas Inseminadas Artificialmente con semen refrigerado diluido en agua de coco en polvo QUE PRESENTA: ADRIANA ZAMORA ESPINOSA ASESORES: M.V.Z. EPO. ARTURO GOMEZ GONZALEZ. M.V.Z. EPO. JORGE OSORIO AVALOS GRUPO: 403 J  UNIO DE 2005INTRODUCCIÓN La inseminación artificial (IA), es la colocación del semen por medios mecánicos en el tracto reproductor de las hembras (De Lucas, 2004). En la actualidad, la inseminación artificial en ovinos se emplea en forma comercial en varios países, sin embargo, su difusión se ha visto limitada y en general utilizada en baja escala debido a las dificultades encontradas en el manejo del semen, en las bajas tasas de concepción y en los altos costos (De Lucas, 2004). En México la inseminación artificial es una técnica poco difundida y utilizada, limitándose a proyectos de investigación, algunos productores que la empiezan a utilizar en animales de alto precio, aunque no necesariamente de alto valor genético y a otros cuantos productores que lo manejan a través de ciertos programas de transferencia de tecnología (De Lucas, 2004). La inseminación artificial puede constituirse en una herramienta útil para el rápido mejoramiento genético de los rebaños al posibilitar disminuir el diferencial de selección por el mejor uso de los carneros de alta calidad, incrementando el mejoramiento genético anual y generacional. Además permitirá a los pequeños productores el acceso a semen de calidad, ya que en la actualidad la compra y el mantenimiento de machos mejorados está fuera del alcance del productor medio (Del Campo, 1990). El manejo del semen como punto esencial para la inseminación artificial, requiere en su procesamiento un manejo cuidadoso y delicado con un diluyente capaz de mantener el poder fecundante de los espermatozoides desde su recogida hasta la fecundación. En la actualidad existen numerosos diluyentes naturales y comerciales, tratando de cubrir los requisitos esenciales para lograr la viabilidad del semen; sin embargo se siguen buscando alternativas que ofrezcan un medio confortable a los espermatozoides con el objetivo final de aumentar las tasas de preñez (Daza, 1997). El agua de coco, por ser pobre en fosfolípidos, se presenta como un diluyente favorable, facilitando un excelente comportamiento del semen caprino, tanto in Vitro como in vivo. Esta alternativa de dilutor ha presentado resultados satisfactorios con el semen diluido y enfriado a 4° C, presentando tasas de preñez superiores a otros, además de obtenerse mayor número de crías hembras (Nunes, 2001). 1 REVISION DE LITERATURA Capítulo I. Inseminación Artificial (IA) La inseminación artificial es el método de reproducción en el que los espermatozoides son transportados al tracto genital femenino, a través de medios mecánicos que sustituyen los habituales órganos especializados del macho. (Del Campo, 1990). Este método constituye un eficiente aprovechamiento del potencial genético de reproductores que mejoran la calidad de los rebaños (Nunes, 2001), incrementando notoriamente la cantidad de hembras que puedan gestarse con un solo reproductor. La IA en los ovinos ha sido utilizada desde los años veinte en la entonces Unión Soviética (De Lucas, 2004); hasta ese entonces el semen era usado en forma natural y solo por pocas horas, pero en el año de 1940 Phillips P. y Lardy logran un diluyente a base de fosfato de sodio y potasio, que agregado a la yema de huevo y enfriado permite la sobre vivencia de los espermatozoides durante varios días (Del Campo, 1990). En general la IA en los ovinos evolucionó conjuntamente con la de los bovinos, pero su difusión se ha visto limitada fundamentalmente a las dificultades encontradas en el manejo del semen, en las bajas tasas de concepción y los altos costos. (De Lucas, 2004 y Salomón et. al. 2000). Capítulo II El semen y sus componentes El semen está compuesto por una porción celular o espermática en un 26 % y otra porción líquida constituida por el plasma seminal formando el 74 % restante al eyaculado (Del Campo, 1993). Desde el punto de vista químico, el semen se encuentra integrado por un 86 % de agua y el 14 % de materia seca, incluyendo minerales (sales de potasio, sodio, calcio y fósforo), varios aminoácidos, carbohidratos, polisacáridos, ácido láctico y cítrico, proteínas, vitaminas y enzimas (Bearden, 1982). 2.1. Morfología normal de los espermatozoides El espermatozoide normal está compuesto de una cabeza y una cola dividida en una pieza intermedia, una pieza principal y una pieza terminal (Del Campo, 1993). Los componentes importantes de la cabeza incluyen el núcleo que contiene el código genético, la cubierta post-nuclear y el acrosoma que contiene las enzimas necesarias para la penetración de la corona radiada y la zona pelúcida durante la fertilización (Del Campo, 1993). En la pieza intermedia se encuentra el manto mitocondrial que contiene enzimas que convierten la fructosa y otros substratos energéticos en compuestos de alta energía que pueden ser utilizados por el espermatozoide (Del Campo, 1993). La pieza terminal difiere de la pieza principal por carecer de una cubierta protectora, pero ambas son de suma importancia por poseer el filamento axial que se compone de un haz de fibrillas que al contraerse impulsan la movilidad del espermatozoide (Del Campo, 1993). 2.2. Composición del plasma seminal Esta porción del eyaculado sirve como medio nutritivo y amortiguador suspendiendo a los espermatozoides y manteniendo su fertilidad, es ligeramente ácido en los ovinos con una presión osmótica similar a la del plasma seminal (Del Campo, 1993). A continuación se esquematizan los componentes del plasma seminal: Iones inorgánicos; sodio y cloro, pero también calcio y magnesio en menores cantidades (Del Campo, 1993). Agentes amortiguadores; el principal es el bicarbonato, encargado de evitar cambios bruscos en el pH seminal, pero este no es suficiente para prevenir la reducción del pH cuando se almacena el semen. Por lo tanto, los buenos diluyentes seminales deben tener capacidad amortiguadora (Del Campo, 1993). Substratos de energía como sorbitol, glicerilfosforilcolina (GPC) y la fructosa, encontrada en grandes cantidades en el semen ovino , y otros compuestos como el ácido cítrico (Del Campo, 1993). Capítulo III Evaluación del semen A pesar de que el porcentaje de preñez es el único test capaz de predecir con un 100% de eficacia, el grado de fertilidad de un reproductor, en seguida se enlistan las diferentes pruebas realizadas para tratar de evaluar la calidad del semen (Bearden y Fuquay, 1992): 3.1. Tests macroscópicos
3.2. Tests microscópicos: Motilidad masal:
3.3. Tests biológicos:
3.4. Tests bioquímicos:
Capítulo IV Almacenamiento del semen 4.1. Importancia y propiedades de los diluyentes del semen Un diluyente es todo aquel compuesto que va a brindar protección al espermatozoide y volumen al eyaculado por periodos cortos o largos de tiempo al conservar su metabolismo, viabilidad y fertilidad (Guzmán, 2004). A continuación se enumeran los hechos más relevantes en la historia con respecto a la dilución:
El éxito de la IA, particularmente en los ovinos, depende en gran medida del desarrollo de diluyentes satisfactorios de semen; los pioneros en la materia de IA encontraron que el semen no diluido vivía poco y sufría de un shock térmico al disminuir la temperatura de 5° C, provocando la muerte de muchos espermatozoides. Resultando obvio entonces que un diluyente satisfactorio debiendo cumplir ciertas características que a continuación se enumeran: (Bearden y Fuquay, 1982).
4.2. Dilución La dilución del semen se justifica por razones técnicas de para poder inseminar a un mayor número de hembras que con semen no diluido y por razones biológicas para mantener el poder fecundante de los espermatozoides desde su recogida hasta la fecundación (Evans y Maxwell, 1990). Para una dilución adecuada, es necesario utilizar semen que cumpla los estándares mencionados en el siguiente cuadro:
4.2.1. Grado de dilución. La dilución del semen se debe hacer tan pronto como sea posible una vez recolectado. Tanto el diluente como el semen deben estar a una temperatura de 30° C para evitar un shock térmico, en seguida se procede a la adición del diluyente al semen, nunca al revés, ya que se pueden ocasionar trastornos en el eyaculado (Evans y Maxwell, 1990). 4.2.2. Volumen de inseminado. Puede variar ligeramente dentro de ciertos límites. El límite inferior viene determinado por el volumen mínimo que se puede manejar convenientemente y con cierta seguridad. El límite superior está determinado por la capacidad del órgano o lugar de inseminación para retener el semen (Evans y Maxwell, 1990). Para la inseminación intrauterina se recomienda una dosis de 0.05 a 0.10 ml para cada cuerno (Evans y Maxwell, 1990). 4.2.3. Soluciones amortiguadoras utilizadas en los diluyentes del semen Este tipo de soluciones son importantes para el mantenimiento del pH, así como ofrecer un medio isotónico (Bearden y Fuquay, 1992).
4.2.4. Bases de diluyentes Los compuestos utilizados en la dilución de semen son múltiples; sin embargo, hasta el momento solo pocos han tenido un real éxito y una amplia utilización. Los dos más conocidos y empleados son los que tienen como base a la yema de huevo y el que tiene como base a la leche (Guzmán, 2004 y Evans, et. al.).
4.2.5. Agentes antimicrobianos Desde los años 40´s, se puso atención al problema de los contaminantes microbianos en el eyaculado; algunos patógenos y otros no, pero aún así los espermatozoides tenían que competir por nutrientes, lo que reducía la viabilidad de estos. Es entonces a final de esta década que se descubren los beneficios de añadir antibióticos y fungicidas a los diluyentes de semen. Tomando en cuenta la inocuidad de estos productos, se recomiendan (Bonadona, 1974): 1, 000 U.I. de penicilina por ml. del diluyente. 1,000 µg de estreptomicina y deshidroestreptomicina por ml del diluyente. 1,000 µg de polimixina B. 4.2.6. Diluyentes más comunes Existen gran cantidad de diluyentes, desde los químicos, hasta aquellos que contienen sustancias orgánicas como la yema de huevo, leche y agua de coco. En seguida se mencionan los diferentes tipos de diluyentes (Galina, 1991):
Existen evidencias en trabajos Alvar et al., sin publicar, citado por Ramón (2000) en el trópico húmedo mexicano, utilizando semen refrigerado, obteniendo porcentajes de fertilidad muy variados dependiendo de la técnica de inseminación, la dosis de semen y diluyente utilizado, como se presenta en el siguiente cuadro:
4.3. Formas de utilización del semen
Capítulo 5. Agua de coco empleada como dilutor El agua de coco, por ser pobre en fosfolípidos, se presenta como un diluyente favorable, facilitando un excelente comportamiento del semen caprino, tanto in Vitro como in vivo. Este dilutor presenta resultados satisfactorios con el semen diluido y enfriado a 4° C (Nunes y Pérez, 2001). 5.1. Propiedades físico- químicas del agua de coco El agua de coco (Cocus nucífera) está compuesta de soluciones ácidas naturales y estériles, conteniendo sales, proteínas, vitaminas, minerales y factores de crecimiento. Presenta una osmolaridad entorno de 500 miliosmoles y un pH de 4.5 (Nunes y Pérez, 2001). La fertilidad de cabras inseminadas con semen diluido en agua de coco es superior a la leche. Además de obtenerse mayor número de crías del sexo femenino. Freitas en 1988, observó un alto porcentaje de crías (55 % de hembras vs 45 % machos), nacidas de inseminación en la cual se utilizó semen diluido en agua de coco. Estos resultados confirmaron la posible influencia del agua de coco sobre la preselección de espermatozoides con el cromosoma Y, favoreciendo de esta manera una mayor tasa de fecundación de los espermatozoides portadores del cromosoma X (Nunes y Pérez, 2001). Buscando aislar la fracción que actúa sobre los espermatozoides, Nunes et al. (1994), promovió el fraccionamiento del agua de coco, aislando el ácido 3- Indol- Acético; sustancia con actividad hormonal estimuladora del crecimiento de vegetales, la cual demostró actividad sobre el metabolismo del espermatozoide, confiriendo un incremento de la motilidad y aumentando la tasa de fertilidad, además de permitir su conservación durante periodos más largos (Nunes y Pérez, 2001). HIPÓTESIS El agua de coco en polvo utilizada como dilutor del semen de carnero produce porcentajes de gestación similares al semen diluido con el protocolo one step. LIMITE DE ESPACIO El presente trabajo se desarrollará en la estación de Santa Maria Casandeje Mpio. de Atlacomulco, ubicada en la zona noroeste del Estado de México. La cabecera municipal se sitúa a 19° 43` 37” (mínima) y 19° 43`67” (máxima) de latitud norte y 99° 42` 12” (mínima) y 99° 52`48” (máxima) de longitud oeste del meridiano de Greenwich; el relieve del municipio varia en sus altitudes sobre el nivel del mar. Limita al norte, con los municipios de Acambay y Temascalcingo; al noreste, con el municipio de San Andrés Timilpan; al este, con los municipios de San Bartolo Morelos y San Andrés Timilpan; al sur y oeste, con el municipio de Jocotitlán; y al noroeste, con los municipios de Temascalcingo y El Oro. La distancia aproximada hacia la capital del estado es de 63 kilómetros. El municipio cuenta con una extensión territorial de 258.74 km.2, que representa el 1.19% con relación al total del territorio estatal. |
